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液相色谱柱基本工作原理

在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。

色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的医学教育网搜集整理。

使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。

由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。

液相色谱柱性能评价

色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。在正常条件下，填料粒度>20μm时，干法填充制备柱较为合适；颗粒<20μm时，湿法填充较为理想。填充方法一般有4种：①高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；②径向加压法，Waters；③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；④干法。柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。

液相色谱仪与气相色谱差别

液相色谱仪在基本概念上和气相色谱器是一致的，因此 设施的基本基本原理类似，可是它们在检查层面是有不一样的地点的，有不一样的，但又有不同点：液相色谱 与气相色谱的关键差别可归结为于以下几个方面：

1、气相方法的不一样：液相色谱仪只需将试样做成水溶液，而气相色谱需加温汽化或裂化；

2、流动相的不一样，在被测组分与流动相中间、流动各相稳定相中间都具有着一定的作用力；

3、因为溶液的黏度较汽体大2个量级，使被测组分在液态流动看中的热扩散系数比在汽体流动看中约小4~5个量级；

4、因为流动相的成分可开展普遍挑选，并可配备成二元或多元化管理体系，达到梯度方向过柱的必须，因此增强了液相色谱的屏幕分辨率（柱效率）；

5、液相色谱选用5~10Lm细颗粒物固定不动相，使液体相在离子交换柱上透水性大大的变小，流动摩擦阻力扩大，务必依靠高压水泵运输流动相；

6、液相色谱仪是在液相中开展，对被测组分的检验，一般选用灵巧的湿式亮度检测器，比如，紫外线度检测器、示差折光率检测器 、莹光亮度检测器等；

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