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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类
腺病毒包装原理
了解产品参数及价格,请搜索“博奥龙”,进入博奥龙官0网,搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
1、一次没用完的板子要带干燥剂放自封袋封好,随盒存放。
2、拿放板子时不要剧烈抖动,以免孔间交叉污染出现错误结果。
3、本试剂一般不会出现两个阳性,但出现两个阳性的现象不论在进口或国产试剂中都是真实存在的,一般会一个 OD 很高,另一个很低但却还能判为阳性,实验分析表明这种情况下以 OD 高值孔为准,出现这种情况有多重原因:
(1)培养的细胞中有饲养细胞残留,
(2)抗0体本身存在变异,
(3)样品为非特异亲和纯化的抗0体或样品是腹0水,
(4)上清出现少量污染,
(5)实验操作粗放,
(6)加错试剂。
4、通用阳性对照数据并不一定完全一样,仅作为试剂有效指示。
水佐剂免0疫步骤
步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。
步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
步骤三:通过后腿小腿肌肉注0射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注0射。
步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。
步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。
注:
抗原注0射以前需要收集一些正常血0清,已备检测抗0体时作为阴性对照。待兔子在新环境中稳定,大概需要四天左右时间,可以进行耳动脉取血。取血量约5ml足矣。
免0疫用的抗原必须纯化,否则影响抗0体的质量。抗原经FCA或FIA充分乳化后才能注0射。将抗原液与佐剂等比例混合后,置于混合器上使之剧烈振荡使抗原充分乳化,乳化过程比较费时、费力,但若乳化不充分,会影响免0疫的效果,振荡后,1000rpm离心一分钟,如水相和油相不分层即可注0射。首0次免0疫用FCA,以后都用FIA。
免0疫方法可采用背部多点注0射法。即于家兔脊柱两旁选4-6点皮下0注0射,每点注0.1ml,间隔2周后再于上述部位选不同点注0射(不要选择临近位点,否则溃疡愈合不好)。每次免0疫的抗原量约100μg。免0疫次数在四五次即可,抗原用量大可以减少次数。
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