病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、 取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1. 将组织块平放于软塑瓶盖或小盒内(直径约2 cm)。2. 如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3. 当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20 s组织即迅速冰结成块。4 在制
尼氏染色
病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、 取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1. 将组织块平放于软塑瓶盖或小盒内(直径约2 cm)。2. 如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3. 当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20 s组织即迅速冰结成块。4 在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5. 若需要保存,应以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1. 样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10 min 让OCT胶浸透组织。2. 取下组织置于锡箔或者玻片上,样品托速冻。【造模机制】以15%氯化钠配制的60%乙醇可以模拟高盐和乙醇对胃的刺激作用,并在用前加热至55℃可模拟高温食物对胃的刺激作用。3. 组织置于样品托上,其上再添一层OCT胶,以完全覆盖为宜,速冻架(PE)上30 min。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍TUNEL染色:基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。据此,可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后,用不同pH值的固绿染液分别染色,使细胞实验中细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。 实验步骤
使细胞或组织贴在载玻片上固定洗涤通透洗涤预平衡用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链终止反应洗涤封片分析样品南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。
病理实验外包,病理染色冰冻切片介绍;冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为切片的方法应用在临床诊断。肺纤维化的病理特点为肺部引起肺泡反复持续性损伤及细胞外基质的破坏、修复和过度沉积。一、 取材
病理实验外包,病理染色组化染色的分类:1)按标记物质的种类,如荧光染料、性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为荧光法、法、酶标法和金银法等。
2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。
3)按结合方式可分为抗原-结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。TTC可以被活细bao中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物,所以活组zhi部分呈现粉红色,而si亡的细胞的还原酶的活力已经消失,因此TTC不能被还原,所以si亡的组织呈现白色。
病理实验外包,病理染色胶原纤维染色法
1.Van Gieson(V.G)***-酸性品红法
鲜红色:胶原纤维
黄色:肌纤维、细胞质、红细胞
蓝褐色:胞核
2.天狼星红(Sirius red)***染色法
红色:胶原纤维
绿色:细胞核
黄色:其他
另:天狼星红***染色法:(偏光显微镜) Ⅰ型:强双折光性,呈黄色或红色纤维 Ⅱ型:弱双折光,呈多种色彩疏网状分布 Ⅲ型:弱双折光,呈绿色的细纤维 Ⅳ型:弱双折光的基膜,呈淡黄色

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