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主营产品:二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE
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体公司来电咨询「在线咨询」

了解产品参数及价格,请搜索“博奥龙”,进入博奥龙官0网,搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~ 博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类
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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。








β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照。也常被用于免0疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时,Actin抗0体和Tubulin抗0体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。




保存条件:

Actin抗0体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。





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多抗制备的概念:由多个B淋巴细胞克0隆所产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤:免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。




多抗制备的制备步骤

一、器材

剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼0科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注0射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等。

二、试剂

生理盐水

弗氏完全佐剂

弗氏不完全佐剂

二甲0苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3

三、免0疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。

四、兔子的选择

兔子的重量应在四斤以上,两耳光滑,明显可见耳静、动脉,健康。

五、免0疫

用生理盐水稀释免0疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0注0射和后大腿进行肌肉注0射。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。









选择性培养

选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨0髓瘤细胞因缺乏次黄 piao呤-鸟piao呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死0亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄 piao呤-鸟piao呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死0亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄 piao呤鸟piao呤磷酸核糖转移酶,并具有骨0髓瘤细胞能无0限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。












人们抽取动物的血液,分离出含抗0体的。这种体内生产抗0体的传统方法有许多缺点。例如所获得的抗0体不纯,不能连续生产,动物饲养与管理工作繁重等,故长期以来医学家们一直在探索在试管内(即体外)生产抗0体的方法, 1976年英国剑桥大学两位科学家Milstein和Koh1er将小鼠瘤细胞与小鼠的脾细胞杂交。小鼠瘤细胞能在体外增殖传代并能分泌无抗0体活性的球蛋白;小鼠脾细胞能产生针对某种抗原的抗0体,但不能在体外增殖。将两者融合成一种杂交瘤细胞,后者继承了两个亲代细胞的特点,既可在体外增殖,又可产生针对某种抗原的抗休。一个杂交瘤细胞在体外不断增殖所形成的细胞集团,被称之为。



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