抑菌效力-培养基
培养基的制备
1.胰酪大豆胨液体培养基
胰酪胨17.0克
氯化钠5.0克
大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克
磷酸氢二钾2.5克
葡萄糖(一水合)2.5克
水1000mL
除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2,加入葡萄糖,分装,灭菌。
纯化水微生物限度试验公司
抑菌效力-培养基
培养基的制备
1.胰酪大豆胨液体培养基
胰酪胨17.0克
氯化钠5.0克
大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克
磷酸氢二钾2.5克
葡萄糖(一水合)2.5克
水1000mL
除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2,加入葡萄糖,分装,灭菌。
胰酪大豆胨液体培养基置 20~25℃培养。
2. 胰酪大豆胨琼脂培养基
胰酪胨15.0克
大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克
琼脂15.0克
水1000ml
除琼脂外,取上述成分,混合。微温溶解,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2,加入琼脂,加热溶化后,摇匀,分装,灭菌。
3.沙氏葡萄糖液体培养基
沙氏葡萄糖琼脂培养基照微生物限度检查法(附录ⅩⅢ C)制备。
2.薄膜过滤法
除另有规定外,按计数方法适用性试验确认的方法进行供试液制备。取相当于1g、1ml或10c㎡供试品的供试液,若供试品所含的菌数较多时,可取适宜稀释级的供试液,照方法适用性试验确认的方法加至适量稀释液中,立即过滤,冲洗,冲洗后取出滤膜,菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基或沙氏葡萄糖琼脂培养基上培养。检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡为单位报告,特殊品种可以xiao包装单位报告。
培养和计数 培养条件和计数方法同平皿法,每张滤膜上的菌落数应不超100cfu。
菌数报告规则 以相当于1g、1ml或10c㎡供试品的菌落数报告菌数;若滤膜上无菌落生长,以<1报告菌数(每张滤膜过滤1g、1ml或10c㎡供试品),或<1乘以zui低稀释倍数的值报告菌数。
商业无菌注意事项
1.要求有厌氧培养的一定要在厌氧环境下培养。
2.取样测pH值,要与同批正常样相比,看是否有显著差异。
3.对pH 值有的样品都要做涂片染色镜检,与同批正常样相比,看是否有明显的微生物增殖现象。
4.保温期间出现的胀包,漏包、或开包发现PH、感官异常、变质,进一步镜检发现有异常数量细菌的样品均应进行划线培养。

供试品中微生物的回收
……涂布法“取15~20ml”修订为“取适量(通常为15~20ml)”。……(2)薄膜过滤法薄膜过滤法所采用的滤膜孔径应不大于0.45jLtm,直径一般为50mm,若采用其他直径的滤膜,冲洗量应进行相应的调整。供试品及其溶剂应不影响滤膜材质对微生物的截留。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时,应保证滤膜在过滤前后的完整性。4、浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45℃左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。
学习:这个“完整性”应该类似生产过程所用的滤膜的完整性,不同的是“保证”的方法是滤器验收、厂家报告单、使用中外观检查等;必要时应该进行适当方式的完整性检测。

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