核酸释放剂使用方法
1.将约2μL液体样品(如全血、细胞培养液、病毒样品、粪便样品)或2mg(约半粒芝麻大小)的固体样品(如动物组织、植物叶片、种子等)加入到50μL本产品中。
注意:样品加入量可能需要根据其DNA的含量稍做调节,如果样品DNA含量少,则用量要增加,但总液体样品用量尽量不要超过本产品用量的1/10;固体样品用量尽量不要超过1mg/10μL的比例。
RNA型WLD8201核酸释放剂代理商
核酸释放剂使用方法
1.将约2μL液体样品(如全血、细胞培养液、病毒样品、粪便样品)或2mg(约半粒芝麻大小)的固体样品(如动物组织、植物叶片、种子等)加入到50μL本产品中。
注意:样品加入量可能需要根据其DNA的含量稍做调节,如果样品DNA含量少,则用量要增加,但总液体样品用量尽量不要超过本产品用量的1/10;固体样品用量尽量不要超过1mg/10μL的比例。
2.对液体样品,室温放置3分钟;对固定样品80℃加热5分钟;对难以的样品(如有厚壁的真菌、石蜡组织切片、血斑),则保温时间可以延长到10-30分钟。
3.简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行PCR扩增或其他扩增(裂解物体积尽量不要超过反应体积的2/5,对50μL体系的扩增,加入的裂解液尽量不要超过20μL。由于各扩增体系成分不同,头次跟本产品组合时尽量做梯度测试,即在50μL的扩增反应中分别加5μL、10μL、15μL、20μL、25μL样品裂解液进行测试)。
4.其余同常规操作。
核酸释放剂如何裂解灭活病毒
裂解病毒的方式有很多种:
1.加热法:通常需要加热80到100摄氏度加热5-10分钟,操作很简单,只用一步即可以得到用于核酸PCR扩增的模板,不需要任何离心、抽提等操作步
骤,比常用的CheleX100提取方法和/方法快。这种方法虽然简单,但是提取的核酸含量较少。
2.浓盐法:高浓度的盐可以破坏核酸与蛋白质之间的次级键,使核蛋白解联,使病毒核酸释放出来。通常使用盐酸胍、异硫酸胍或非胍盐裂解盐,
可以直接裂解灭活病毒,不需要加热处理样本,简便。
核酸释放剂的注意事项
1. RNA样本采集后应立即进行提取,样本质量将影响提取效果;
2.本产品不具有核酸分离与纯化功能,适用于对核酸纯度要求不高的实验;
3.如样本中有额外保存液(样本保存液中若含酶克制剂或高浓度的盐),提取的核酸样本可能会影
响后续扩增反应;
4.检测前必须仔细阅读说明书,严格按照要求进行操作;
5.全血、溶血的粪便样本,提取效果较差,建议采取其它试剂盒提取。
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