生物样品在 降温冷冻过程中,当由液态向固态变化的相变期内会释放一定热量,使其温度回升, 不控制降温速率的冷冻过程将会导致组织细胞。准确地测定生物样品的相变点, 用微机编制降温程序,以便在样品相变时加大液氮输入量,克服相变样品温度的回 升,使细胞安全而迅速地度过相变期,这是提高被冻样品成活率的关键环节。固定在冷冻室内的温度传感器T1, 将冷冻过程中温度变化通过智能温控仪表的RS485
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生物样品在 降温冷冻过程中,当由液态向固态变化的相变期内会释放一定热量,使其温度回升, 不控制降温速率的冷冻过程将会导致组织细胞。准确地测定生物样品的相变点, 用微机编制降温程序,以便在样品相变时加大液氮输入量,克服相变样品温度的回 升,使细胞安全而迅速地度过相变期,这是提高被冻样品成活率的关键环节。固定在冷冻室内的温度传感器T1, 将冷冻过程中温度变化通过智能温控仪表的RS485通讯协议接口传输给计算机的上位机软件。上位机软件按照用户的编程,计算出当前的目标温度与实测温度的偏差值,用比例、微分、积分算法算出控制量。通过PDI输出电路去控制电磁阀的开关。当电磁阀开通时,液氮喷入冷冻室,风扇使液氮雾化并均匀地在箱内循环。改变电磁阀的开关频率,就控制了箱内的降温速度。
免液氮程序降温仪,与传统的用于IVF实验室、以液氮为基础的可控速率冷冻设备不同,CRF-1因为不需要液氮作为制冷媒介,具有无交叉污染风险和可以用于洁净空间以及隔离设施的特点。其整洁和安静的台式设计及其性能上的冷冻后细胞复活能力,优于或与标准的液氮冷却器相当。由于不用液氮、也不使用酒精,所以没有潜在的火灾风险,也省去液氮储藏罐占用空间的烦恼。
降温保存,即玻璃化方法就是用高浓度的冷冻稀释液,以极快的速率降温,使溶液内没有足够的时间形成冰晶核就直接转变成无形态的玻璃样固体的过程。此方法的优点是不用的程序控制降温仪,操作简便、,减轻损伤,但是由于在降温过程中需要加入大量的冷冻保护剂,高达40-60%v/v,这些冷冻保护剂往往存在一定毒性会内部细胞,同时由于玻璃化过程中为了确保整个生物样品的内部和外部均能实现降温,需要减少样品的尺寸、以及增加和外界超低温环境(比如液氮)的接触面积。因此这种暂时只适用于小尺寸、小计量生物样品的保存,仅有ul单位。所以,目前大家还是通常采取慢速降温进行低温保存。
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