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水佐剂免0疫步骤
步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。
慢病毒载体
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水佐剂免0疫步骤
步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。
步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
步骤三:通过后腿小腿肌肉注0射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注0射。
步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。
步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。
1、水佐剂不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克0隆抗0体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。
2、水佐剂是一种水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可用于免0疫动物。
3、水佐剂使用肌肉免0疫途径,与常规小鼠单克0隆抗0体制备过程中使用足垫免0疫或脾内免0疫相比,极大地方便了使用。
4、水佐剂的zui重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆抗0体。常规多克0隆抗0体制备多使用兔子,不但免0疫针次多、抗原用量大和抗0体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托外单位制备。使用水溶免0疫佐剂,任何动物实验人员均可方便地制备小鼠多克0隆抗0体,只需要简单地免0疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体。
5、水佐剂建议室温运输,2~8oC保存,无菌取用,有效期6个月。
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
球蛋白是机体受抗原(如病原体)刺激后产生的,其主要作用是与抗原起反应,生成抗原-抗0体复合物,从而阻断病原体对机体的危害,使病原体失去致病作用。另一方面,球蛋白有时也有致病作用。临床上的过敏症状如花粉引起的支气管痉挛,青导致全身过敏反应,皮肤荨(俗称块)等都是由球蛋白制剂能增体抗病毒的能力,可作药用。如注0射人或盘中提取的丙种球蛋白制剂可防治、性等。
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