QuickAntibody-Mouse5W （5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂）
QuickAntibody-Mouse5W用途
通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体，ELISA滴度（Cutoff值为0.1000）可达到1:10000-1:10000000。
QuickAntibody-Mouse5W使用方法（详见使用说明书）
1.
佐剂
QuickAntibody-Mouse5W （5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂）
QuickAntibody-Mouse5W用途
通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体，ELISA滴度（Cutoff值为0.1000）可达到1:10000-1:10000000。
QuickAntibody-Mouse5W使用方法（详见使用说明书）
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度（按每针次50μl用量配制）。
备注：推荐使用的抗原用量为
（1）免0疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg；
（2）免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg；
（3）偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2. 充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1迅速混匀。
备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。
QuickAntibody系列免0疫佐剂有哪些特点？
与常规使用的弗氏佐剂相比，QuickAntibody免0疫佐剂具有免0疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、易获得构象型表位的抗0体等多方面优点，详述如下：
1. QuickAntibody只需两针免0疫，无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备，与弗氏佐剂相比可减少免0疫针次。
2. QuickAntibody通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量，从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg（通常为小鼠5-20μg，
兔子20-50μg）；（2）免0疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg（通常为小鼠1-5μg ，兔子5-10μg）。
材料与方法
一、材料
AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。
二、方法
1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液，析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。
第yi组：AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma，美国)混合，充分乳化后注入8～12周龄Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量抗原加不完全福氏佐剂(Sigma，美国)腹腔注射，4周后用同量抗原加不完全福氏佐剂腹腔注射，融合前3 d作腹腔注射加强免0疫。
1． 9 腹0水效价的测定
1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL，包被Elisa 酶标板过夜，以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照，用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价，用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳，用 制 备 的 MRJ单克0隆 抗0体 作 为 一 抗，设置抗0体稀释浓度 分别为1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。进 行Western Blot 检测。
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