大鼠胃yan模型
【造模机制】以15%氯化钠配制的60%乙醇可以模拟高盐和乙醇对胃的刺激作用,并在用前加热至55℃可模拟高温食物对胃的刺激作用;脱氧胆酸钠可以模拟十二指肠液(内含胆汁)反流对胃的刺激作用。
【造模方法】Sprague Dawley大鼠,雄性,平均体重170g。脱氧胆酸钠需每次灌胃前新鲜配制,终浓度为20mmol/L。灌胃用60%乙醇是以15%氯化钠加无水乙醇
he染色
大鼠胃yan模型
【造模机制】以15%氯化钠配制的60%乙醇可以模拟高盐和乙醇对胃的刺激作用,并在用前加热至55℃可模拟高温食物对胃的刺激作用;脱氧胆酸钠可以模拟十二指肠液(内含胆汁)反流对胃的刺激作用。
【造模方法】Sprague Dawley大鼠,雄性,平均体重170g。脱氧胆酸钠需每次灌胃前新鲜配制,终浓度为20mmol/L。灌胃用60%乙醇是以15%氯化钠加无水乙醇配制而成,灌胃前恒温至55℃。实验周期共13周。实验~35天,大鼠自由饮用脱氧胆酸钠溶液,同时每隔5天以60%乙醇灌胃(10ml/kg)一次,第36~91天,每3天交替饮用脱氧胆酸钠或15%乙醇,同时每隔7天以60%乙醇灌胃一次。造模期间,配合使用饥饱失常法,即:~56天,饱食2天,禁食1天;第57~91天,饱食2天,禁食禁水1天。组织、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法来显示,其化学基础是利用guo碘酸的氧化作用,打开碳链形成醛,生成的醛基与Schiff试剂中的无色品红反应形成紫红色化合物。13周后,模型组大鼠体重比对照组明显下降,胃黏膜厚度明显减小。大体病理可见胃黏膜皱襞变平甚至消失,黏膜血管暴露、黏膜呈颗粒或结节状,组织病理可见黏膜内炎性细胞聚集、腺体明显减少,排列不整,黏膜厚度明显减小。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍PAS染色:PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。PAS染色利用把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和 醛基反应使呈现紫红色,显示糖原定位。染色步骤
1. 石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗);
2. 蒸馏水洗;
3. 酒清夜10min;
4. 自来水冲洗10min;
5. Schiff氏液10min;
6. 流水冲洗5min;
7.用哈瑞精或迈耶精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化);
8. 流水冲洗5min;
9. 常规脱水、透明、封固。
结果
PAS阳性为红色,细胞核蓝色。
病理实验外包,病理染色冰冻切片介绍;冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。TTC(2,3,5—氯化三苯ji四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年刚开始合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为切片的方法应用在临床诊断。一、 取材
病理实验外包,病理染色组化染色的分类:1)按标记物质的种类,如荧光染料、性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为荧光法、法、酶标法和金银法等。
2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。
3)按结合方式可分为抗原-结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;13周后,模型组大鼠体重比对照组明显下降,胃黏膜厚度明显减小。亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。

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