(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。
(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。
(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；
(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余组织再消化
动物模型
(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。
(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。
(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；
(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余组织再消化一次。
(5)4℃1000rpm离心10min，弃上清，加入种植液1重悬，培养箱内差速贴壁30min；
(6)收集上清，台盼蓝染色计数，按6*105cells/孔种入六孔板（种植液1），37℃，5%CO2，95%饱和湿度的培养箱中培养；
(7)培养第二天，全换液更换为种植液2；
(8)培养第四天，半量换液加入5uM的，24h全量换液；
(9)之后每周换液两次。
原位杂交过程
杂交前可进行预杂交，以防止较高的背景染色。预杂交条件与杂交条件相同，只是预杂交液中不含探针和硫酸葡聚糖。
靶DNA的变性（对mRNA的原位杂交无需此步）
样品DNA的变性在DNA-DNA杂交检测中是必须的步骤，但同时可能会造成样品形态学的部分破坏，此步是实验中需要优化的一个步骤。常用的变性方法为碱变性和热变性，实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得佳条件。
如使用热变性方法，可在杂交时将探针的变性和样品DNA变性同步进行：将样品和探针溶液加盖盖玻片，置于烘箱80℃变性，染色体DNA样品处理2min，后冷却至37℃进行杂交。组织样品DNA的变性时间可增加至80℃10min。
有关动物实验室检测的要求及标准
动物实验室又叫动物房，是指适宜于饲养、繁育实验动物的建筑物。这类建筑应具有特定的环境要求和实验手段，以保证动物的和实验研究的准确可靠性。建设动物实验室时有着不一样的要求及标准，今天咱们主要来看看动物实验室建设的标准有哪些？
1．SPF级动物实验室：
SPF及动物实验室符合动物居住的要求，严格控制人员、物品和空气的进出，适用于饲育清洁级或无特定病原体级实验动物。经过的监测中心检测，通过现场验收的屏障环境，才可以作为清洁级或SPF级动物的饲养环境。
2．实验室动物房|动物实验室|动物研究室分类及标准：
实验室根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级，分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。
简单的说就是用各种动物当做实验的模型对象，来模拟人做科学研究的。比如说我们上学的时候都用过青蛙做实验，也有用鱼或者蚯蚓还有猫的，这些就是简单的一种造模了，通常来说在实验室里面用到的比较多的实验动物就是小白鼠了，这个我们大家都是有了解的。
用途有哪些 ：
运用这种模技术的实验内容也是非常多的，具体的可以根据你要研究的不同科研项目来定，比如说你想实验一种因素如果作用在人类的身上会有什么影响或者造成什么效果的话，就可以先把这个因素作用在你要实验的动物身上，先观察一下具体反应，做好相关的实验记录，后在实验周期结束以后再观察一下实验动物的具体结果就可以了。比如说我们都知道小脑是支配我们人体平衡能力的一个**系统，如果想实验这个理论的话，就可以用大头针对实验动物进行硬脑模穿刺，这样就可以摧毁动物的一侧小脑，等小脑被摧毁以后，你就可以看到实验的动物对象已经不能够维持基本的平衡了，会在桌子上不停的滚动，这个过程就是一个基本简单的实验动物造模。
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