低温为什么可以进行生物样品的保存？主要是因为：水份是生物样品里的主要成份，而在深低温，即温度-８0℃，水存在晶体状态和玻璃态２种物理方式。而从热力学角度分析，水的这２种状态的水分子都具有很高的粘度，并且几乎不会扩展。水的这个在深低温下几乎不会扩散的特性为生物样品的低温保存提供了可能。深低温状态下水存在的晶体状态和玻璃态２种状态，低温保存也同样分为慢速降温和降温（玻璃化）
液氮程序降温仪
低温为什么可以进行生物样品的保存？主要是因为：水份是生物样品里的主要成份，而在深低温，即温度-８0℃，水存在晶体状态和玻璃态２种物理方式。而从热力学角度分析，水的这２种状态的水分子都具有很高的粘度，并且几乎不会扩展。水的这个在深低温下几乎不会扩散的特性为生物样品的低温保存提供了可能。深低温状态下水存在的晶体状态和玻璃态２种状态，低温保存也同样分为慢速降温和降温（玻璃化）２种方式。
生物样本大都对温度极其敏感，尤其是细胞样本、制品。随着细胞的发展，细胞冷冻技术及效果变得更加重要。现在也有一些冷冻降温是通过高溶度的冻存保护剂保障活率，大剂量的冻存保护剂往往对细胞、回输受体有害，如何安全有效的提高细胞及制剂的冷冻效果，是一个重要步骤。生物样品的成功冻存不仅取决于合适的冷冻保护剂，更取决于冷冻的速率、的温度控制和合理的温度梯度（40℃~80℃）。
步骤：(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、，逐滴加入二亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞，用加的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示完全之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
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