ELISA(酶联免疫吸附剂测定)一般指酶联免疫吸附剂测定酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA或ELASA)指将可溶性的抗原或抗体结合到polystyrene等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分
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ELISA(酶联免疫吸附剂测定)一般指酶联免疫吸附剂测定酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA或ELASA)指将可溶性的抗原或抗体结合到polystyrene等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。
测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多抗体和使用杂交瘤技术得到的单抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量的保证才能充分发挥其方法学的优点。
elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高。
制备方法
包括以下步骤:1)抗原表位的计算机筛选;2)抗原的制备;3)血清的采集;4)间接ELISA方法的建立;5)间接ELISA方法的敏感性和特异性验证;6)试剂盒的稳定性验证;7)对屠宰场进行临床检测。
该方法简单、、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。
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