试纸条原理
CRISPR 用探针一端标记生物素,另外一端同时标记 FAM 和 TAMRA 作为 Report1; 一端标记生物素,另外一端同时标记 FAM 和 DIG 作为 Report2。当样品中探针被切开 后,生物素端及未被切开的完整探针会通过 SA(链亲和素)磁珠吸附去除,处理后上 清只留下探针的双标记物端即 FAM-TAMRA 和 FAM-DIG,通过试纸条即可检
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试纸条原理
CRISPR 用探针一端标记生物素,另外一端同时标记 FAM 和 TAMRA 作为 Report1; 一端标记生物素,另外一端同时标记 FAM 和 DIG 作为 Report2。当样品中探针被切开 后,生物素端及未被切开的完整探针会通过 SA(链亲和素)磁珠吸附去除,处理后上 清只留下探针的双标记物端即 FAM-TAMRA 和 FAM-DIG,通过试纸条即可检测出对应 被切断的探针,切断探针含量越高,胶体金颜色越深。
试纸条检测方法
在使用此试剂前必须仔细阅读试剂的说明书,需严格按照试剂说明书执行有关操作,否则无法保证可靠结果。
1.准备:检测前将检测卡、样本、样品稀释液恢复至室温(15-30℃),建议检测卡在恢复室温后再拆封,并在有效期内尽快使用,防止检测卡受潮。
2.加样:待检测样品吸取4ul样本加入200ul样品稀释液进行稀释,再通过SA(链亲和素)磁珠充分吸附(建议取终浓度为10nM左右样品,每0.2mL加40ulSA磁珠,充分混匀,室温旋转孵育30-60min,用磁力架进行充分吸附后,取上清进行点样,高浓度探针或大体积可适当增加SA磁珠的用量进行反应),吸取50ul滴加在加样孔处,开始计时。
3.检测:10-15min根据质控线(C)、检测线(T)判读结果。
试纸条的样本采集
1.年龄14岁以上的,可自行进行鼻拭子采样。自检者先用卫生纸擤去鼻涕。小心拆开鼻拭子外包装,避免手部接触拭子头。随后头部微仰,一手执拭子尾部贴一侧鼻孔进入,沿下鼻道的底部向后缓缓深入1~1.5厘米后贴鼻腔旋转至少4圈(停留时间不少于15秒),随后使用同一拭子对另一鼻腔重复相同操作。
2.年龄2—14岁自检者应由其他成人代为采样。采样时,先用卫生纸擤去鼻涕,随后头部微仰。采样人员小心拆开鼻拭子外包装,手部避免接触拭子头,一手轻扶被采集人员的头部,一手执拭子贴一侧鼻孔进入,沿下鼻道的底部向后缓缓深入1厘米后贴鼻腔旋转至少4圈(停留时间不少于15秒),随后使用同一拭子对另一鼻腔重复相同操作。
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