武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
实验室前期研究表明,将来自水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae pv. o
亚细胞定位

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
实验室前期研究表明,将来自水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)的Harpin蛋白编码基因hrf1转化水稻,获得的转基因株系NJH12能够提高对水稻稻瘟病、水稻白叶枯病和干旱的抗性。对NJH12表达芯片进行分析,筛选出大量与受体植株有显著差异表达的基因。 OsSsrl (Oryza sativa L. salt-sensitive related gene1, GeneBank登录号为NM_001065574)是NJH12表达谱中的一个表达量上调基因,为了进一步分析其序列特征、启动子序列、亚细胞定位及在水稻不同组织和各种逆境胁迫下的表达模式,通过生物信息学手段、洋葱表皮亚细胞定位和Real-Time PCR对其进行研究。序列分析表明OsSsr1的开放阅读框为2004bp,编码一个由667个氨基酸组成并含有5个跨膜区的蛋白,该蛋白N端含有一个信号肽。其启动子序列包含TGACG-motif、ABRE、 TCA-element、Box-W1、W box和Box S等多个与胁迫相关的顺式作用元件。GFP融合表达显示,OsSsrl蛋白定位于细胞膜。Real-Time PCR结果表明,OsSsrl基因在水稻不同不同组织中均有表达,在叶部的表达量,其次为根,在幼穗中的表达量;OsSsrl表达水平受干旱、高温、高盐、低温、机械伤害、稻瘟病菌、MeJA和ABA的诱导上调。
本研究旨在通过对根癌农侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰类化合物诱导元件的具体位置。在本研究中采用根癌农(A grobacterium tume faciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响。结果显示,在OD600值为0.8的农液中15min,共培养3d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰类化合物诱导元件位于ATG上游-220~-143bp之间。结果表明新的瞬时表达系统可以有效地进行启动子的分析。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
以生菜、洋葱、萝卜为试材,用转人植物表达载体pSH-NGN的根癌农EHA105分别 采用真空渗透法和直接注射法瞬时表达ChIFN-γ蛋白,研究其宿主植物和方法。结果显示,真空渗透法和直接注射法在瞬时表达效率上差异不大,真 空渗透操作上更简便、更易掌握;新鲜市售生菜,真空抽气25min,共培养3d,瞬时表达效率达到3645pg/g,ChIFN-γ 蛋白得到高效表达。
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