武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
采用根癌农介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植
亚细胞定位公司

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
采用根癌农介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP基因在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新基因的亚细胞定位和瞬时表达奠定了基础.
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
泛素-蛋白酶体通路在植物防卫反应(包括反应)中发挥重要作用,泛素连接酶(ubiquitin ligase, E3)则是参与这一过程的重要组分。本研究旨在通过和分析与马铃薯晚疫病抗性相关的泛素连接酶家族中的成员,初步揭示这类基因在马铃薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的调控作用,或它们在马铃薯防御晚疫病菌侵染的信号传导网络中的作用,为进一步深入开展抗性机理研究奠定基础。 本实验室从晚疫病诱导的马铃薯水平抗性材料构建的cDNA文库中筛选出两个与Avr9/Cf-9 rapidly elicited protein (ACRE,具有泛素连接酶E3活性)基因有很高同源性的EST片段(10-A12和08-E12)。本研究中,我们了这两个EST片段所代表的基因,StRFP和StPUB,并研究了其生物学功能。 StRFP基因的全长cDNA为1354 bp,包含一个789 bp的开放阅读框(ORF),编码262个氨基酸,含有高度保守的RING-H2型RING指结构域、跨膜结构域和GLD结构域,是一个新的马铃薯ATL (Arabidopsis toxico para levadura)蛋白。StRFP基因位于马铃薯第3条染色体上,不含内含子。马铃薯基因组中可能有1-2个StRFP基因拷贝或与之同源性高的基因。利用洋葱表皮细胞进行的StRFP-GFP融合蛋白亚细胞定位结果显示,StRFP在细胞膜上或膜外表达。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
CaNZ是CaN(Calcineurin)基因的正义表达基因,是在真核生物中存在的一个Ca2+及CaM依赖的Ser/Thr蛋白磷酸酶,它包括一个催化亚基calcineurin A和一个Ca2+结合亚基calcineurin B,其催化亚基calcineurin A活性受CaM调节。本实验在筛选高效再生体系基础上,利用带有信号肽和CaM结合肽的载体,以农为媒介将CaN基因导入中,预期过表达的融合蛋白将会被分泌到细胞外并与质外体CaM相结合,抑制质外体CaM的功能,从而构建出质外体CaM的反义植株,观察质外体CaM反义植株的表型改变,为进一步开展CaM在植物生长发育过程中的功能研究提供基础。 研究结果如下: (1)以14-16d叶片为外植体,以MS为基本培养基,通过附加配方对比,筛选出适合材料再生的培养基配方:MS+IAA 0.5mg·L-1+6-BA 1.5mg·L-1为芽分化的培养基,1/2MS+NAA0.1mg·L-1为生根培养基。 (2)用Kan进行叶片抗性筛选。当Kan浓度小于50mg·L-1时,叶片能正常分化出芽;当Kan浓度为75mg·L-1时,叶片大多数白化;当Kan浓度超过100mg·L-1时,芽分化停止。所以,以Kan浓度100mg·L-1为叶片分化芽抗性筛选的临界浓度;而培养物根对较为敏感,Kan 50mg·L-1为筛选临界值。
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