武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(4
ELISA试剂盒供应商

武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
6. 温育:操作同2。
7. 洗涤:操作同4。
8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B050μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血1清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。在受到心肌细胞的刺激后(例如,心肌细胞拉伸),proBNP在蛋白酶作用下列解为NT-proBNP(氨基末端-proBNP或N端-proBNP)和生物活性激1素BNP。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的步,下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。1、 血1清
血1清是1常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒1素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血1清析出。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。(1好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血1清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血1清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
1.3.4 敏感性
在测定血1清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。在临床检验中,如用抗hCG抗血1清作为妊1娠诊1断试剂检定尿液中hCG,只能用于hCG浓度较高的试验,否则妇女生理性排泄入尿液中的微量LH将与之发生交叉反应。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍,达ng/ml水平。例如,用放1射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg,其敏感度可达0.1ng /ml。
1.4 免疫测定在临床检验中的应用
由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血1清或单克1隆抗1体,利用此抗1体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广,在临床检验中可用于测定:
1) 体液中的各种蛋白质,包括含量极1少的蛋白质如甲胎蛋白等。
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