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河南小型蛋白电泳槽生产厂家服务为先

DNA电泳 DNA电泳常见问题分析及解决方案 DNA条带模糊:1,DNA降解避免核酸酶污染;2,电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液;3,所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;4, DNA上样量过
小型蛋白电泳槽生产厂家






DNA电泳

DNA电泳常见问题分析及解决方案

DNA条带模糊:1,DNA降解避免核酸酶污染;2,电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液;3,所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;4, DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量;5,DNA样含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐;6,有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白;7,DNA变性电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

不规则DNA条带迁移:1, 对于λ/Hind III片段cos位点复性电泳前于65℃加热DNA 5分钟,然后在冰上冷却5分钟;2,电泳条件不合适电泳电压不超过20V/cm;温度<30℃;经常更换电泳缓冲液;3,DNA变性以20mM NaCl Buffer稀释DNA,电泳前勿加热

带弱或无DNA条带:1,DNA的上样量不够增加DNA的上样量;聚酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高,上样量可适当降低;2, DNA降解避免DNA的核酸酶污染;3,DNA走出凝胶缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;4,对于EB染色的DNA,所用光源不合适应用短波长(254nm)的紫外光源

DNA带缺失:1,小DNA带走出凝胶缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;2,分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间,核准正确的凝胶浓度;3, DNA 变性电泳前请勿高温加热DNA链,以20mM NaCl Buffer稀释DNA;4,DNA链巨大,常规凝胶电泳不合适 在脉冲凝胶电泳上分析

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蛋白电泳




蛋白电泳样品的浓缩效应

1:凝胶孔径的不连续性:

浓缩胶为大孔胶;分离胶为小孔胶。在电场作用下,样品颗粒在

大孔胶中泳动的阻力小,移动速度快;当进入小孔胶时,受到的阻

力大,移动速度减慢。因而在两层凝胶交界处,样品迁移受阻而压

缩成很窄的区带。

2: 电位梯度的不连续性:

电泳开始后,快离子的移动会在其后形成一个离子强度很低 的低电导区,使局部电位梯度增加,将蛋白质浓缩成狭窄的区带
大多数蛋白质在pH6.7或8.3时均带负电荷,在电场中,都向正极移动。




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