武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内定位对蛋白质组学和代谢组学
亚细胞定位公司
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内定位对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种GFP标签蛋白质表达载体,分别在GFP的N和C端预留位点,以目的基因。利用该基因载体,分别内切酶Fok I的切割结构域与MS2噬菌体外壳蛋白MCP的串联蛋白（Fok I：MCP：Fok I,FMF）至GFP的N和C端,得到FMF与GFP的融合蛋白GFP：FMF和FMF：GFP,其中FMF的N端带有细胞核定位信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察GFP荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的基因和GFP的表达载体p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦结果显示侵染了只含GFP载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到GFP的绿色荧光,而侵染了含核定位信号FMF：GFP和GFP：FMF 2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞定位,具有简单、高效和通用性的特点。
了红树植物‘白骨壤’中甜菜碱／脯氨酸转运蛋白基因（BetlProT2），采用根瘤农介导的方法，将携带有GFP报告基因的35S—Bet／ProT2-GFP融合质粒转化洋葱表皮细胞，亚细胞定位分析表明，Bet／ProT2是定位在细胞质膜上的跨膜蛋白。进一步利用农介导法将Bet／ProT2转人粳稻‘日本晴’，鉴定结果表明，BetlProT2基因已经整合到‘日本晴’的基因组中并有效表达。转Bet/ProT2基因水稻的耐盐性明显提高，在甜菜碱和脯氨酸同时或分别存在的条件下，转基因水稻可以在含有150mmol·L^-1NaCl的液体培养基中正常生长，同时叶片中H2O2含量较低；而野1生型水稻在相同处理条件下出现明显枯萎，叶片中H2O2大量积累。结论：红树Bet／ProT2基因能通过吸收甜菜碱和／或脯氨酸来降低氧化伤害，显著提高转基因水稻的耐盐能力。
是常见的、对人类健康危害比较严重的环境污染物之一,可通过皮肤、呼吸道和消化道等途径进入人体,导致身体组织发生病变,从而引起多种疾病和的发生。因此,毒性研究已经成为大家关注的焦点之一。能抑制细胞分裂,诱导微核形成,导致部分细胞,但的毒性作用机制不是很清楚。酵母具有遗传背景简单,生长周期短等优点,是研究真核生物细胞学机制的模式生物。已有研究证明,可以诱导酵母细胞凋亡,并且伴随着胞内活性氧(ROS)水平的升高,但是关于诱导酵母细胞凋亡的调控机制研究尚处在起步阶段,尤其是动物体内相对保守的凋亡抑制基因BCL-2和CED-9在此过程中的作用尚未见报道。本文以酵母细胞为主要材料,研究了亚诱导细胞的作用机制。主要实验结果如下： 浓度为1-7 mmol/L的亚可抑制酵母细胞生长,并具有剂量依赖性,其中7 mmol/L亚几乎完全抑制了细胞的生长和分裂。亚可诱导酵母细胞,细胞率随处理浓度的升高和作用时间的延长逐渐升高。利用ROS荧光指示剂DCFH-DA, Ca2+荧光指示剂Fluo-3AM和NO荧光指示剂DAF-FM DA检测胞内ROS、Ca2+和NO水平,发现亚可诱导酵母胞内ROS, Ca2+和NO水平显著升高。
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