武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-
TPO ELISA试剂盒

武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、 细胞裂解液
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑1制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
6.透蜡
放入二甲本和石蜡各半的混合液60min,再放入石蜡Ⅰ60分钟、石蜡Ⅱ透蜡30分钟。
透蜡的目的是除去组织中的透明剂(如二甲本等),使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以便包埋。透蜡时间根据组织大小而定。透蜡应在恒温箱内进行,并保持箱内温度在55-60℃左右,注意温度不要过高,以免组织发脆。一般置于恒温箱0.5h。
透蜡注意事项
(1)尽量保持在较低温度中进行,以石蜡不凝固为度;
(2)透蜡温度要恒定,不可忽高忽低;
(3)操作要迅速,力求在1短的时间内完成石蜡透入过程,以免引起组织变硬、变脆、收缩等。
2. ELISA的类型
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗1体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:(1)固相的抗1菌素原或抗1体,即'免疫吸附剂'(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗1体,称为'结合物'(conjugate);透明注意事项(1)使用透明剂时,要随时盖紧盖子,以免空气中的水分进入。(3)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型:
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