色谱分离法常用的操作法有:(1)迎头分离法,当溶液连续通入吸附固定床时,溶液中诸组分因吸附能力大小不同,可顺序地由固定床另一端排出;(2)冲洗分离法,在送入溶液的同时,通入不被吸附的载体,可顺序地被吸附和解吸,然后以一定的间隔隔离开;(3)顶替分离法,在载气中加入吸附能力强的组分,使依次顶替被吸附的诸组分。色谱分离除已在分析技术中广泛应用外,也已在化工、冶金和环保等领域中加以利用。
色谱法
层析泵
色谱分离法常用的操作法有:(1)迎头分离法,当溶液连续通入吸附固定床时,溶液中诸组分因吸附能力大小不同,可顺序地由固定床另一端排出;(2)冲洗分离法,在送入溶液的同时,通入不被吸附的载体,可顺序地被吸附和解吸,然后以一定的间隔隔离开;(3)顶替分离法,在载气中加入吸附能力强的组分,使依次顶替被吸附的诸组分。色谱分离除已在分析技术中广泛应用外,也已在化工、冶金和环保等领域中加以利用。

色谱法
定义 色谱法又称色层法或层析法,是分离和鉴定化合物的有效方法。
应用
(1)分离混合物 在中药提取物的有效部位中,往往含有结构相似、理化性质相似的几种成分的混合物,用一般的化学方法很难分离,可用色谱法将它们分开。
(2)精制化合物 在提取、分离得到有效成分时,往往含有少量结构类似的杂质,不易除去,也可利用色谱法除去杂质得到纯品。
(3)鉴定化合物 在一定条件下,纯粹的化合物在薄层色谱或纸色谱中都有一定的Rf值,在气相色谱和液相色谱中有一定的保留时间,所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或利用标准品的对照来初步确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。
反相层析在吸附层析中,性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。用HPLC做反相层析常用的ODS柱,即在支持物的表面上连接了C18H37Si—基团。
同系层析在核酸分析中,将样品经核酸酶部分裂解成不同长度的核苷酸片段,用同位素标记后,在DEAE纤维素薄层上分离,用含有未标记的相同的核苷酸片段作展层溶剂,这样,未标记的核苷酸把标记过的核苷酸推进,使按分子量大小不同把标记核苷酸片段,按由小到大的次序排列,达到分离的目的。于是把这种层析法称为同系层析。同系层析和电泳相结合曾用于寡核苷酸的顺序分析。
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