吸附层析:指的是层析固定相与流动相在相对移动过程中,溶质和溶剂分子在吸附剂表面上的活性位点相互竞争的吸附过程。
吸附层析常用固定相:氧化铝硅胶活性炭 聚酰胺
吸附层析固定相选择: (1) 样品的溶解性;水溶性样品如糖类化合物、某些苷类用活性炭分离。它在石油、化工、卫生、生物科学、环境科学、农业科学等领域都发挥着十分重要的作用。黄酮类化合物则主要采用聚酰胺分离,绝大部分有机化合物可以
制备液相色谱分离纯化
吸附层析:指的是层析固定相与流动相在相对移动过程中,溶质和溶剂分子在吸附剂表面上的活性位点相互竞争的吸附过程。
吸附层析常用固定相:氧化铝硅胶活性炭 聚酰胺
吸附层析固定相选择: (1) 样品的溶解性;水溶性样品如糖类化合物、某些苷类用活性炭分离。它在石油、化工、卫生、生物科学、环境科学、农业科学等领域都发挥着十分重要的作用。黄酮类化合物则主要采用聚酰胺分离,绝大部分有机化合物可以采用硅胶和氧化铝作为固定相(2) 样品的酸性:硅胶略酸适用于弱酸和中性物质分离,氧化铝适用于碱性物质分离(3) 化合物的极性: (4) 吸附剂对组分的作用
层析根据固定相与溶质(试料)间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型(离子交换层析)等三种类型。但这并不是很严格的,有时常见到其中间类型。此外,近来也应用亲和层析,即将与基质类似的化合物(通常为共价键)结合到固定相上,再利用其特异的亲和性沉淀与其对应的特定的酶或蛋白质。盐析沉淀法:原理:由于大量盐的溶入,使高分子物质失去水化层,分子之间相互聚集而沉淀。
按层析的机理划分:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。吸附层析:利用吸附剂表面对不同组分吸附性能的差异,达到分离鉴定的目的。分配层析:利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数不同,使之分离。离子交换层析:利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同。酸碱沉淀法:此法是利用某些成分在酸(或碱)中溶解、在碱(或酸)中沉淀的性质达到分离的方法。凝胶层析:利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。
随着科学技术的发展以及生产实践的需要,层析技术也得到了迅速的发展。这里就不得不提到两位在层析技术发展做出重要贡献的人,他们是英国生物学家马丁(Martin)和辛格(Synge)。是他们首先提出了色谱塔板理论。色谱塔板理论其实是基于热力学近似的理论,这个理论中涉及的对象有目标分离物,色谱柱。这里色谱柱好比是一个分馏塔。理论是这样的:将目标分离物倒入“分馏塔”,这样就会在分馏塔板间移动,在每一个塔板内组分分子在固定相和流动相之间形成平衡,随着流动相的流动,组分分子不断从一个塔板移动到下一个塔板,并不断形成新的平衡。色谱分离法常用的操作法有:(1)迎头分离法,当溶液连续通入吸附固定床时,溶液中诸组分因吸附能力大小不同,可顺序地由固定床另一端排出。谱柱的塔板数越多,则其分离效果也就越好。这个分离过程提升分离效率,并且定量的进行描述,分析这个分离过程。
这是个进步,并且马丁(Martin)和欣革(Synge)还提出更为远见卓识的预言:1、流动相可用气体代替液体,因为与液体相比,分离时候,物质间作用力更小,对分离也就更有好处。2、若能够使用非常细的颗粒填料,并在色谱柱两端施加较大的压差,从而增加了理论培板数,这将会大大提高分离效率。常用吸附剂的吸附力的强弱顺序为:活性炭、氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙、石膏、纤维素、淀粉和糖等。

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