核酸电泳染色液
核酸电泳常用染色液
1、溴化乙锭(ethidium bromide, EB)
较为常用的核酸荧光染料,可嵌入核酸双链的配对碱基之间,在紫外线激发下,发出桔红色荧光。 EB-DNA复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。这些变性剂可以破坏或改变蛋白质的结构,把绝大部分蛋白质分离成组成它们
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核酸电泳染色液
核酸电泳常用染色液
1、溴化乙锭(ethidium bromide, EB)
较为常用的核酸荧光染料,可嵌入核酸双链的配对碱基之间,在紫外线激发下,发出桔红色荧光。 EB-DNA复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。这些变性剂可以破坏或改变蛋白质的结构,把绝大部分蛋白质分离成组成它们的亚基。若EB背景太深,可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCI2中5min,使非结合的EB褪色,这 样可检查到10ng的DNA样品,EB也可用于检测单链DNA或RNA,但其对单链核酸的亲和力相对较小,荧光产率也相对较低。
2、吖啶橙(acridine orange, AO):
吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间,在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光;还通过静电与单链核酸的磷酸基结合,在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光。因此可区分单链和双链核酸,灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。玻璃板与垫条的一体化设计,备选多种厚度的玻璃板和制胶梳子、制胶架,操作方便,可同时运行二块8。但吖啶橙的染色操作要求严格,应在 22℃,0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.0)中避光浸泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。
3、亚甲蓝(methylene blue)
可将RNA染成蓝色,但灵敏度不高,而且操作时间长。染色过程:胶浸泡于0.02%的亚甲蓝,10mmol/L Tris-Ac(pH8.3),4℃放置1~2h,用净水洗5~8h(反复换水),带型肉眼可见,较低检测量为 250ng。
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电泳的分类
北京龙方科技为您提供信息如下,希望能对您有所帮助! 龙方电泳 伴您成功!
⑴ 区带电泳:电泳过程中,待分离的各组分分子在支持介质中被分离成许多条明显的区带,这是当前应用较为广泛的电泳技术。
⑵ 自由界面电泳: 这是瑞典Uppsala大学的科学家Tiselius较早建立的电泳技术,是在U形管中进行电泳,无支持介质,因而分离效果差,现已被其他电泳技术所取代。
⑶ 等速电泳:需使用电泳仪,当电泳达到平衡后,各电泳区带相随,分成清晰的界面,并以等速向前运动。
⑷ 等电聚焦电泳:由两面性电解质在电场中自动形成pH梯度,当被分离的生物大分子移动到各自等电点的pH处聚集成很窄的区带。
电泳篇
电泳技术是一门古老而又年轻的技术。核酸电泳凝胶的染色凝胶的染色和观察凝胶中核酸带的染色,常用溴化乙锭法和银染法。自从1946年瑞典物理化学家Tiselius研制的首台商品化移界电泳系统问世以来电泳分析技术发展极其迅速了,特别是随着支持介质的更新,已有越来越多的自动化电泳分析仪相继被引入临床实验室,并在各种疾病的临床诊治中发挥着越来越重要的作用。
蛋白电泳槽参数
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感谢您使用LF系列产品,为了保证您在使用过程中能够正确操作,请您仔细阅读本说明书。
功能概述
本产品适用于生物技术行业中的小型聚丙烯酰胺凝胶电泳。
凝胶面积(W×L):8.3cm×7.3cm
加样梳:10(齿)、15(齿) 凝胶厚度:1.0mm、1.5 mm缓冲液容积:2 块胶 700 毫升;4 块胶 1000 毫升。
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