武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
1、染色过强 原因 解决办法 抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长 降低抗1体滴度（一般指浓缩性抗1体）抗1体孵育时间：室温1
PGE2 ELISA试剂盒
武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
1、染色过强 原因 解决办法 抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长 降低抗1体滴度（一般指浓缩性抗1体）抗1体孵育时间：室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准 2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 组织中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭，孵育时间延长 组织中含内源性生物素 正常非免疫动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间
（1）分子结构不同：BNP的分子结构中有一个非常重要的二硫键连接构成的环状结构，可与钠尿肽受体结合发挥生物学活性作用；NT-proBNP为一直链结构，是失去生物活性的氨基酸片段。
（2）在体内的清除途径不同：BNP的清除主要通过与钠尿肽清除受体（NPR-C）结合继而被胞吞和溶酶体降解，只有少量的BNP通过1脏清除，当1功能缺失时，中性肽链内切酶（NEP）也可打开BNP的环状结构而对它进行清除；Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。NT-proBNP清除的唯1途径是小球滤过，1功能出现缺失对NT-proBNP的代谢影响极大。
3. 洗涤
材料经固定后,PBS或双蒸水冲洗约3小时。（20，30，30，60）
4. 脱水
材料依次经80%、90%、、各级乙醇溶液脱水，各30min
注意事项：
（1）脱水必须在有盖的玻璃品中进行，防止吸收空气中的水分。
（2）在更换高一级的脱水剂时，1好不要移动材料以免损坏，可用吸管吸出器皿中的脱水剂，再用吸水吸尽器皿内剩余液，然后于皿中加入高一级脱水剂。
（3）在低浓度酒精中，每级停留不宜太长，否则易使组织变软，助长材料的解体。
（4）在高浓度或纯酒精中，每级停留的时间也不宜太长，否则会使组织变脆，影响切片。
（5）如需过夜，应停留在80%酒精中。
17．脱水Ⅱ
将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色，然后放入无水乙醇中3-5min。后用吸水纸吸干多余的乙醇。
18．透明
切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。
二甲本应尽量保持无水，应经常更换，或用纱布包无水硫1酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲本中出现白雾现象，说明脱水未尽，应退回乙醇中重新脱水，否则切片难以镜检。
19．封藏：中性树胶封存
因切片经二甲本透明，使用中性树胶作为封藏剂，树胶可用二甲本稀释至合适的稠度。
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