使用血清细胞培养的操作技巧
1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2.将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
3.一旦在新鲜培养基中添加了血清和抗生su时,应该在两到三周内
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使用血清细胞培养的操作技巧
1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2.将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
3.一旦在新鲜培养基中添加了血清和抗生su时,应该在两到三周内使用它。因为一些抗生su和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
4.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
血清中的沉淀物对细胞培养有什么影响?
(1)细胞生长。我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,我们的客户以及其它血 清生产商也证明了这一点。
(2)过滤。如果血清中出现大量的沉淀物,血清将很难过滤。一般说来,因为在血清生产时 zui后已经经过 100nm 或者 40nm 的过滤处理,并且经过了严格的无菌检测,因此不推荐再过 滤用于细胞培养的血清。在实验室中没有必要再过滤处理血清,在大觃模的细胞培养中往往将 血清直接加到培养基中一起过滤。
血清中的沉淀物对细胞培养有什么影响?污染。磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争duan,研究者可能会在血清中观察到一些 絮状的沉淀,因此就会比较警觉的去做无菌试验,将血清放在培养箱中培养几天,结果可能会观察到更多的絮状沉淀,因此就断定血清被污染了。并且当研究者将血清样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点,因此就更加确认是血清被污染了。于是,研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认,但zui终确定血清没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生,我们建议不要直接将血清放在培养箱中培养观察是否有菌,而是将血清加到琼脂板上进行培养以观察是否有细菌生长。另外,也可以进行革兰氏染色,在油镜下观察,以确认是否有污染。

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