关于抗体的选择
种属特异性:同 种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或设计多肽抗原的,根据蛋白的同源性的情况与其他种属发生交叉 反应。需要参照说明书注明的可反应种属信息。一些稀有种属很难找到抗体,可以通过蛋白的序列比对,选择同源序列免yi 的抗体,不过一般这种情况生产商不会受 理其关于质量的申诉,如果可以
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关于抗体的选择
种属特异性:同 种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或设计多肽抗原的,根据蛋白的同源性的情况与其他种属发生交叉 反应。需要参照说明书注明的可反应种属信息。一些稀有种属很难找到抗体,可以通过蛋白的序列比对,选择同源序列免yi 的抗体,不过一般这种情况生产商不会受 理其关于质量的申诉,如果可以申请到免费的抗体样品,则利于抗体选择。
怎样选择适合你实验需要的抗体?
(1)确定抗体的名字,注意中英文名字、它名、亚型等信息。
(2)确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证,请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。
(3)确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种物种实验,请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。
抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。收到抗体后请务必在12000rpm 离心1-5min 后再打开管盖进行分装和保存!质优的抗体使用非常特殊的储存管,只有在12000rpm 离心1-5min 才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来。即使是在10000rpm 离心也会导致离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象!
在选购胎牛血清问题上我们还是从以下几点来分析:
1、渗透压——使用凝固点降低的方法检测渗透压。我们每天使用美国技术研究所标定的标准溶液对我们的渗透压检测仪器进行校准。
2、测定pH值——同样每天使用美国技术研究所标定的标准溶液对pH计进行校准
3、电泳图谱——鉴定血清的整体性质。样品被加到醋酸纤维素介质中并在缓冲体系内迁移。条带经染色、清洁、干燥后用密度仪进行扫描以检测白蛋白和球蛋白组分的相对浓度。
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