武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。本实验室前期从枳中分离了FLC同源基因PtFLC,发现PtFLC在不同发育时期存在选择性剪切,并分离出了五个
洋葱亚细胞定位方法
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。本实验室前期从枳中分离了FLC同源基因PtFLC,发现PtFLC在不同发育时期存在选择性剪切,并分离出了五个转录本,这种调控方式与草本植物不同。
[背景与目的]脂肪酸合酶(Fatty acid synthase, FASN)是脂肪酸生物合成过程中将小分子碳单位聚合成长链脂肪酸的关键酶,能够调控内源性脂肪酸的合成,其主要产物是软脂酸,并且以甘油三酯的形式存储能量,主要参与磷脂合成、细胞膜构造、肺表面活性物质生成、细.大豆是重要的油料作物和植物蛋白质资源,在食品工业和农业生产中占有重要地位。..
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。通过气相色谱法对其胞内脂肪酸组成进行分析后发现,毕赤酵母含有C16:1、C17:1、C18:1三种单不饱和脂肪酸和亚油酸(LA,C18:2)、α-亚麻酸(ALA,C18:3)两种多。
几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,广泛存在于植物细胞中,是抗真菌防卫反应体系的重要组成部分.该文深入分析了1种三七几丁质酶基因PnCHI1的功能.构建PnCHI1的亚细胞定位载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1定位于细胞壁中.构建PnCHI1的原核表达载体,诱导并纯化获得重组蛋白,体外平板抑菌实验结果显示PnCHI1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的抑制活性.采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根癌农介导将PnCHI1转入中过量表达.qRT-PCR分析结果表明PnCHI1在T2代转基因中大量表达,同时叶片接种实验显示PnCHI1转基因对茄腐镰刀菌的抗性增强明显.结论:PnCHI1是定位于细胞壁的几丁质酶,体外能抑制几种三七根腐病真菌,在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性,推测PnCHI1是三七中参与根腐病防卫反应的重要抗病基因.
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。胞质Ca~(2+)是重要的第二信使,通过Ca~(2+)结合蛋白产生磷酸化信号级联,调控下游基因表达。
重金属转运蛋白P-type ATPase(HMA)已被证实参与植物体内的重金属运输,HMA5主要参与铜的转运。高等植物中的GS同工酶主要分为两类:胞质型GS1主要同化从土壤吸收的初级氨及再同化从植物体内各个N循环途径所释放的氨。在模式植物拟南芥、水稻和黄瓜中对HMA5基因进行了较多的研究,但是对豆科植物HMA5的研究鲜见报道。实验室前期在天蓝苜蓿中分离到一个与铜胁迫及共生结瘤相关的HMA5基因,为了对此类基因在豆科植物共生结瘤中的作用进行深入研究,本研究对全基因组已测序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因组进行筛查,寻找HMA5同源基因并通过表达模式分析初步判断其与共生结瘤的关系,在此基础上,以其中的MTR_8g079250基因为对象,进行亚细胞定位、组织表达、RNA干扰和过量表达等研究,初步鉴定该基因在共生结瘤中的功能。1、MTR_8g079250的亚细胞定位构建MTR_8g079250的洋葱表皮亚细胞定位载体,通过基因枪轰击转化洋葱表皮细胞,在激光共聚焦显微镜下观察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在细胞膜上表达,在细胞核上也有微量的表达;构建MTR_8g079250的叶片亚细胞定位载体,通过根癌农介导注射叶片的方式进行转化,结果表明目的基因主要定位在细胞膜和细胞核上;2、MTR_8g079250的组织表达构建PMTR_8g079250::GUS融合表达载体,通过农发根转化的方式转入蒺藜苜蓿根部,经培养后,进行GUS染色观察。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。构建PnCHI1的原核表达载体,诱导并纯化获得重组蛋白,体外平板抑菌实验结果显示PnCHI1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的抑制活性。
为建立根癌农介导的香蕉遗传转化系统,本研究以雄性花诱导产生的贡蕉胚性悬浮系为转化受体,从潮筛选浓度和筛选方法两方面进行了优化。研究结果表明,贡蕉悬浮系在M2液体培养下潮的适合筛选浓度为5mg/L。但是马铃薯是同源四倍体,遗传分离复杂,加之高淀粉、低还原糖和低温下不糖化的育种材料有限,故运用常规育种方法培育淀粉含量高、低还原糖和抗低温糖化的优良品种难度极大。将液体共培养7d后的贡蕉胚性悬浮系转接到M2液体筛选培养基进行培养,每10d继代一次。GUS组织染色表明,经过
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