武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血1清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本
HL ELISA试剂盒
武汉默沙克生物科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血1清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。用亲和层析法提取的特异性抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于免疫测定中可得到更好的效果。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的步,下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。1、 血1清
血1清是1常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒1素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血1清析出。如果抗原或抗1体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象(zonephenomenon)。(1好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血1清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血1清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
1.3.4 敏感性
在测定血1清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。如果仅凭实验数据无法判断,您可以将试剂盒发回给我们进行售后检测。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍,达ng/ml水平。例如,用放1射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg,其敏感度可达0.1ng /ml。
1.4 免疫测定在临床检验中的应用
由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血1清或单克1隆抗1体,利用此抗1体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广,在临床检验中可用于测定:
1) 体液中的各种蛋白质,包括含量极1少的蛋白质如甲胎蛋白等。
⑦切成的蜡带到20-750px长时,右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起,以免卷曲,并牵引成带,平放在蜡带盒上,靠刀面的一面较光滑,朝下,较皱的一面朝上。
⑧用单面刀片切取蜡片一小段,放在载玻上加水一滴,置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。
⑨切片工作结束后,应将切片刀取下用氯1仿擦去刀上沾着的石蜡,把切片机擦拭干净妥为保存。
9. 展片、贴片
打开水浴锅,使水温维持在40-45℃,另准备30%乙醇溶液。
② 切片时,将一碗30%乙醇溶液放于切片机旁的桌面上。
② 用小镊子夹取预先用刀片割开的蜡带,放在乙醇溶液的水面上,使切片展开。(可省)
③小镊子轻轻地将连在一起的切片分开,用一个载玻片将切片完整,已展开的切片捞至温水中,使之充分展开。
2. ELISA的类型
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗1体。脱蜡复水将温箱温度调至65℃,待温度控制在60℃时,将切片连同切片架放入干燥的温箱内3-5小时至蜡熔化。在这种测定方法中有三个必要的试剂:(1)固相的抗1菌素原或抗1体,即'免疫吸附剂'(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗1体,称为'结合物'(conjugate);(3)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型:
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