为何培养基保存于 4°C 冰箱中,颜色会偏暗红色,且 pH 值会越来越偏碱性?
培养基保存于 4°C 冰箱中,培养基内之 CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而 培养基中之酸碱指示剂(通常为 phenolred)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之 结果,将造成细胞生长停滞或si亡。若培养基偏碱时,可以通入无菌过滤之 CO2,以调整 pH 值。
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为何培养基保存于 4°C 冰箱中,颜色会偏暗红色,且 pH 值会越来越偏碱性?
培养基保存于 4°C 冰箱中,培养基内之 CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而 培养基中之酸碱指示剂(通常为 phenolred)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之 结果,将造成细胞生长停滞或si亡。若培养基偏碱时,可以通入无菌过滤之 CO2,以调整 pH 值。
细胞培养的污染源
霉菌污染:种类很多,污染的多是曲霉菌,白色念zhu菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。霉菌污染后多数在培养液中形成淡黄色或是白色的漂浮物,一般肉眼可见,较易被发现,短期内培养液多不变混浊。倒置显微镜下可以看见细胞之间有纵横交错穿行的丝状,树枝状或管状菌丝,并漂浮在培养液中。很多菌丝在高倍镜下可以看见链状排列的菌株。念zhu菌及酵母菌菌株呈卵圆形,散在细胞上及细胞周边生长。处理:确认是霉菌污染,如果细胞种类不是特别的珍贵,直接放弃,并将实验环节消毒。万不得已,可以尝试抗霉菌素如两xing霉 su B来清楚污染,实际操作中效果很难保证。
胎牛血清的使用要注意哪些
1、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
2、若必须做血清的热灭活,请遵守56。C,30分钟的原则,并且随时摇 晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 [5]血清解冻后发 现有絮状沉淀物出现,该如何处理 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离 心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方 法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
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