武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区
亚细胞定位
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰类化合物诱导元件位于ATG上游-220～-143bp之间。
GFP，实际是给你要研究的物质加上标记，在此相当于报告蛋白的作用。构建PnCHI1的亚细胞定位载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1定位于细胞壁中。使用GFP必须构建融合蛋白载体，并在转染之后有效表达。这样，若在荧光显微镜下看到细胞内某一部位存在GFP信号，说明和GFP融合的蛋白也存在于该部位，这样就达到了确定某物质亚细胞定位的目的。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。亚可诱导酵母细胞,细胞率随处理浓度的升高和作用时间的延长逐渐升高。
了红树植物‘白骨壤’中甜菜碱／脯氨酸转运蛋白基因（BetlProT2），采用根瘤农介导的方法，将携带有GFP报告基因的35S—Bet／ProT2-GFP融合质粒转化洋葱表皮细胞，亚细胞定位分析表明，Bet／ProT2是定位在细胞质膜上的跨膜蛋白。通过比较不同侵染液浓度、侵染时间、取材部位、预处理等条件下的转化效果,优化了农介导的洋葱鳞茎内表皮细胞转化系统,并且成功检测到大蕉ASR蛋白(MpASR)与GFP的融合蛋白在洋葱表皮细胞中的分布。进一步利用农介导法将Bet／ProT2转人粳稻‘日本晴’，鉴定结果表明，BetlProT2基因已经整合到‘日本晴’的基因组中并有效表达。转Bet/ProT2基因水稻的耐盐性明显提高，在甜菜碱和脯氨酸同时或分别存在的条件下，转基因水稻可以在含有150mmol·L^-1NaCl的液体培养基中正常生长，同时叶片中H2O2含量较低；而野1生型水稻在相同处理条件下出现明显枯萎，叶片中H2O2大量积累。结论：红树Bet／ProT2基因能通过吸收甜菜碱和／或脯氨酸来降低氧化伤害，显著提高转基因水稻的耐盐能力。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。结论:PnCHI1是定位于细胞壁的几丁质酶,体外能抑制几种三七根腐病真菌,在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性,推测PnCHI1是三七中参与根腐病防卫反应的重要抗病基因。
洋葱(Allium cepa L.)属百合科葱属,是世界主栽蔬菜之一,也是我国主要的出口蔬菜之一。甘蔗是的糖料作物,甘蔗黑穗病已成为世界性甘蔗主要病害,也是我国甘蔗栽培上严重的真菌病害,挖掘甘蔗自身抗病基因对抗病育种有重要意义。FT(FLOWERING LOCUS T)基因是开花植物光周期反应过程中调控植物成花的关键基因,也是重要的开花整合因子。实验室在前期工作中已经成功了洋葱的开花素类似基因Ac FT1及Ac LFT,为确定其功能,本试验分别构建了Ac FT1及Ac LFT的正义、反义和RNAi干扰的植物表达载体,通过冻融法导入到根癌农EHA105中,进而通过花序侵染法转入模式植物拟南芥中。通过荧光定量PCR法测定Ac FT1及Ac LFT在拟南芥抽薹前叶片中的相对表达含量,观察转化植株的形态学指标,继而确定Ac FT1及Ac LFT在洋葱成花中的作用,为实现洋葱抽薹开花的基因调控提供参考。试验结果归纳如下:⑴构建了Ac FT1的正义植物表达载体p Z-Ac FT1,反义植物表达载体p R-AcFT1,RNAi植物表达载体p RNAi-Ac FT1;构建了AcLFT的正义植物表达载体p Z-AcLFT,反义植物表达载体p R-Ac LFT,RNAi植物表达载体p RNAi-Ac LFT.;⑵利用冻融法将重组质粒p Z-Ac FT1、p R-Ac FT1、p RNAi-Ac FT1、p Z-Ac LFT、p R-Ac LFT、p RNAi-Ac LFT导入根癌农EHA105中,利用花序侵染法对拟南芥进行转化。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。本中,我们首先了PtWRKY89基因,并对其进行了组织表达分析及亚细胞定位,进一步构建载体转化毛白杨,在转基因植株中分析了该转录因子在病害胁迫生理过程中的调控作用。
综述了根癌农介导的遗传转化近几年获得的新进展在转化机理方面，对农自身转录与调控的研究已相当深入，而对有关的植物编码因子的研究也已取得了实质性进展；蔗果寡糖是寡糖中非常重要的一类，广泛存在于洋葱、香葱、牛蒡、菊芋、香蕉、小麦、黑麦、燕麦中，形式多种多样。在转化范围上，对真菌与裸子植物的转化取得了不少进展，单子叶植物尤其是一些有重要经济价值的禾谷类作物应用农介导相继获得了转化植株；在转化方法方面，发展了新的简单有效的整体植株法，并将Ｔ－ＤＮＡ转移和整合原理结合到基因枪等ＤＮＡ直接转移方法上；细菌人工染色体与农的联合应用赋予了其大片段ＤＮＡ转化的功能．针对上述领域，指出了其中仍然存在的一些问题并提出了一些构想．
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