细胞培养常见的支原体污染为6种: 发酵支原体(M.fermentans),唾液支原体(M.salivarum),口腔支原体(M.orale),精氨酸支原体(M.arginini),猪鼻支原体(M.hyorhinis),莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)等,有些是动物来源,有些是人来源,支原体没有细胞壁,所以使用破坏细胞壁类药不具效用,建议使用专为支原体开发的处理试剂保护您
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细胞培养常见的支原体污染为6种: 发酵支原体(M.fermentans),唾液支原体(M.salivarum),口腔支原体(M.orale),精氨酸支原体(M.arginini),猪鼻支原体(M.hyorhinis),莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)等,有些是动物来源,有些是人来源,支原体没有细胞壁,所以使用破坏细胞壁类药不具效用,建议使用专为支原体开发的处理试剂保护您珍贵的细胞。
细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,应该仔细观察每种细胞的状态,抱团并不一定代表不好:1,若细胞轮廓清晰,可看清楚一个个的细胞,像葡萄一样,一串串的,就是状态好的,说明细胞在分裂。2,但大部分细胞抱团不是一件好事!如果轮廓消失,出现细胞融解或细胞变灰暗、透光性变差,就是细胞死了。葡萄状和抱团,在镜下其实很容易区别。抱团死的细胞可以看到细胞碎片。
细胞衰老的检测:1.DNA损伤检测,在衰老细胞中会启动DNA 损伤信号p53,细胞衰老通路p53是被细胞DNA损伤而受到DNA损伤回应通路的激。2. β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal)活性染色,β-半乳糖苷酶主要位于溶酶体, 当细胞衰老发生时, 溶酶体膨胀并且增多, β-半乳糖苷酶明显积累在溶酶体中, 因此SA-β-gal染色法为检测细胞衰老普遍常见的指标。不过在一些特殊情况下,例如,饥饿引发的细胞休眠(quiescence)也会出现SA-β-gal染色呈现阳性。
在生物反应器中生产需要对悬浮的生产细胞扩大培养。多个用于生产慢病毒的细胞系(293T、293FT、293SF-3F6)被报道易于在化学成分限定的培养基(Freestyle 293 and F17, Invitrogen, Carlsbad, CA; HyQSFM4TransFx293, Hyclone, Logan, UT)中适应悬浮培养。这些细胞可以在没有为载体的情况下迅速悬浮生长,这使得它们的培养和扩大比贴壁培养的细胞容易很多。此外,培养基中没有其他动物来源的组分是临床生产合适的情况,它可以降低被外源物质污染的风险。
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