如何预防细胞老化?1. 防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代好。2.在间充质细胞培养时必然要进行消化,但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用,因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适pH和浓度,不然就会使细胞老化或者分化。2. 在开始养细胞传代时,也要特别注意冻存细胞,
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如何预防细胞老化?1. 防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代好。2.在间充质细胞培养时必然要进行消化,但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用,因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适pH和浓度,不然就会使细胞老化或者分化。2. 在开始养细胞传代时,也要特别注意冻存细胞,以保持细胞有种子存在,可以有效避免细胞损伤。
细胞培养时可能导致衰老的原因:1.细胞传代次数比较多,一定要控制细胞传代次数!大量扩增细胞,将细胞进行冻存,在必要的时候重新复苏。2.胰酶消化时间太长,胰酶消化时间过长容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松;细胞传代时需要留意胰酶消化的时间。消化过度,在消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,建议使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞衰老和分化。
大多数大规模生产都是小规模生产的直接放大,即通过增加培养/生产单元来实现。生产基本上采用大量的多层培养系统(Cell Factories(CF)(CF-10))或者Cell Stacks(CS)因为易于操作,10叠层装置(CS-10)是选,虽然原则上40叠层装置同样也可以用,但是因为它重量增加的原因所以需要特殊的处理系统。此外,每层平板的气体交换及培养基层不可能一致,因此用显微镜控制40叠层装置细胞的生长很困难。生产要么采用放在层流工作台的开放模式,要么采用半封闭模式,后者对操作人员、环境及终产品的安全性更高。
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