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全基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提菌株的鉴定:对筛选得到的乳酸菌进行16S rDNA序列分析,确定其种属。将活化好的菌液,进行菌株的全基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16],然后对基因组DNA的16S rDNA区域进行PCR扩
解淀粉芽孢杆菌厂
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视频作者:天津开发区坤禾生物技术有限公司
全基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提
菌株的鉴定:对筛选得到的乳酸菌进行16S rDNA序列分析,确定其种属。将活化好的菌液,进行菌株的全基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16],然后对基因组DNA的16S rDNA区域进行PCR扩增,上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′,下游引物1492R序列:5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′,扩增片段为1 500 bp。解淀粉芽孢杆菌产生的物质到目前为止,研究已经发现,解淀粉芽孢杆菌可以产生蛋白、脂肽、聚酮化合物等物质,它们可以改变生物膜的通透性和完整性,从而破坏细菌。PCR体系50 μL:10×buffer 5 μL;脱氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL;上游引物(25 μmol/L)0.5 μL;下游引物(25 μmol/L)0.5 μL;Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL;模板DNA 1.5 μL ;ddH2O 37 μL。PCR扩增条件为:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;72 ℃ 5 min,2~4反应步骤进行30个循环。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度,将达到测序要求的扩增产物送至上海华大基因进行测序,将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST进行比对,并确定其种属。

解淀粉芽孢杆菌F1株拮抗的适宜培养条件
在畜产品加工领域的应用
单核细胞增生李斯特菌作为一种常见的食源性致病菌,其引起的李斯特菌病由于高致死率而被广泛关注。解淀粉芽孢杆菌分泌的胞外物质能够产生溶藻作用,而且随着菌体浓度的增加,对鱼腥藻的去除效果越显著,从而改善水体环境。Kaewklo等发现,解淀粉芽孢杆菌SP-1-13LM株产生的一种新细菌素amysin具有抗李斯特菌的作用,纯化的amysin可抑制产单核细胞李斯特菌、沙门菌和志贺菌。100℃条件下amysin的活性可保持60 min,在pH为3~9的条件下均有活性,但是在蛋白酶κ、α-胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶作用下活性会消失,说明其为天然的蛋白质,SDS-PAGE分析纯化的分子量为5.2 ku。其抗李斯特菌的活性在4℃保存的片状香肠中也被观察到,推测可作为一种安全的生物防腐剂。
饶胜其等研究表明,解淀粉芽孢杆菌F1株拮抗的适宜培养条件为初始pH 5.5、32cC培养48 h;添加0.4%蔗糖、0.2%柠檬酸铵、0.02%KNO3的营养肉汤发酵上清液对的抑菌率为75.2%;研究还发现,该上清超滤液(30~100 ku)能抑制的孢子萌发、延缓菌丝发育,质量浓度为0.1 mg/mL的蛋白能完全抑制的产生。解淀粉芽孢杆菌的这些优良特性在环境保护、农业生产方面都有很大应用潜力近年来,解淀粉芽孢杆菌对农业生产的作用逐渐受到重视。
此外,解淀粉芽孢杆菌产生的凝乳酶还可以用于奶酪的加工中,且有助于蛋白水解率的提高,缩短成熟期。

解淀粉芽孢杆菌作为新的益生菌添加剂具有广阔的应用前景
目前,国内外研究人员对关于从植物及土壤中分离鉴定得到不同解淀粉芽孢杆菌菌株的报道较多,并且进一步分析研究了其代谢产物,发现对多种植物病原真菌及细菌有较好的抑制效果;也有不少学者从动物粪便及肠道中分离得到新的解淀粉芽孢杆菌,并将其作为益生菌添加剂添加到饲粮中用于动物生产,有较好抑制致病菌的效果,提高动物生产。但Jerzsele等[35]的研究表明:解淀粉芽孢杆菌对人工产气荚膜梭菌而引起的肉鸡坏死性的无显著效果,说明不同的解淀粉芽孢杆菌菌株抑菌能力和作用效果存在差异。解淀粉芽孢杆菌作为新的益生菌添加剂具有广阔的应用前景,有必要进一步筛选出更适宜在饲粮中添加的新,使其能作为益生菌在畜牧养殖业中广泛应用。另外目前关于其抑菌机理及促生长等方面的报道并不多,因此还需要进一步进行深入研究,在分子及基因水平阐述作用机理。
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