若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下来;若是悬浮细胞,请直接按以下步骤进行:1. 以200-300g离心3分钟,收集细胞。2. 用BI冻存液将细胞重悬(不需回温),将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml,添加到冻存管中(一般每管1ml)。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中,置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜(或不需要程序降温)。
无血清细胞冻存液批发
若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下来;若是悬浮细胞,请直接按以下步骤进行:1. 以200-300g离心3分钟,收集细胞。2. 用BI冻存液将细胞重悬(不需回温),将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml,添加到冻存管中(一般每管1ml)。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中,置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜(或不需要程序降温)。4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。5. 冻存24小时后,建议检测细胞存活率。
合成培养基(Synthetic/Artificial medium)由高纯度化学成分(无机盐、氨基酸、维生素、含碳物质等)与纯化水配制而成,所有成分都可知其确切含量;合成培养基可依实验目的可分为以下三种。短时间保存细胞活性,即各类平衡盐溶液,具有特定的pH和渗透压;能维持细胞离开生物体后几小时内的活性。延长细胞存活时间,即基础培养基,在平衡盐溶液中添加各种有机化合物,配合适当的实验操作条件,可将细胞培养至多代。特殊功能,根据实验目的(分化、增殖等),将基础培养基额外添加各类因子的特殊培养基。
当需要进行细胞共培养、细胞趋化、细胞迁移以及细胞侵袭等研究的时候,需要在培养板上放入小室。小室内通称上室,培养板内则称下室,小室的底部有通透性的膜,一般常用聚碳酸酯膜(PC);根据实验需求选择不同孔径的聚碳酸酯膜, 并且经过不同处理,就可以进行上述的实验。因为聚碳酸酯膜具有通透性,下层培养液中的诱导性成分或是趋化因子,可以影响到上室内的细胞功能,不同厂家对小室的命名也不同,如Transwell、Boyden chamber、Millicell或是Thincert。
植物细胞的原生质层相当于一层半透膜。当细胞液浓度小于外界浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,原生质层与细胞壁分离,也就是发生了质壁分离。当细胞液浓度大于外界溶液浓度时,外界溶液中的水分透过原生质层进入细胞液中使原生质层复原,逐渐发生质壁分离的复原。
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