如何预防细胞老化?1. 防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代好。2.在间充质细胞培养时必然要进行消化,但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用,因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适pH和浓度,不然就会使细胞老化或者分化。2. 在开始养细胞传代时,也要特别注意冻存细胞,
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如何预防细胞老化?1. 防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代好。2.在间充质细胞培养时必然要进行消化,但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用,因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适pH和浓度,不然就会使细胞老化或者分化。2. 在开始养细胞传代时,也要特别注意冻存细胞,以保持细胞有种子存在,可以有效避免细胞损伤。
Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)是目前常使用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。主要用于生长的细胞,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种。DMEM含更高浓度的NaHCO3,要用10%的CO来平衡,当然也可以在较低CO浓度下使用。DMEM-高糖(标准型)更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的培养,也可用于杂交瘤中瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
ATP发光法,ATP是细胞的能量直接来源,ATP发光法是藉由检测细胞内ATP含量来分析细胞增殖。市面上的原理是利用外源的萤火虫荧光素(Luciferin)与荧光素酶(Luciferase),以细胞内含的ATP为能量来源,发生氧化反应产生生物冷光,因此可通过监测冷光光度,来对应ATP含量并判断细胞增殖状况。EdU检测法,EdU原理跟BrdU检测法很像,并加入能与Edu反应的荧光染料,即可利用检测荧光值侦测应用于细胞增殖,或在细胞组织级别作为标记跟踪等研究,实验过程不需要经过BrdU检测法的DNA变性处理。
原核细胞 Procaryotic/Prokaryotic cell 指没有核膜且不进行有丝分裂、减数分裂、无丝分裂的细胞。这种细胞不发生原生质流动,观察不到变形虫样运动。鞭毛(Flagellum)呈单一的结构。光合作用、氧化磷酸化在细胞膜进行,没有叶绿体(Chloroplast)、线粒体(Mitochondrion)等细胞器(Organelles)的分化,只有核糖体。由这种细胞构成的生物,称为原核生物,它包括所有的细菌和蓝藻类。即构成细菌和蓝藻等低等生物体的细胞。
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