怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢,常见的检测方法几种:1.分离培养法,将疑样本接种到支原体培养基中,观察菌落生成。缺点:培养时间长,须3~5周才能判断。2.DNA荧光染色法,利用荧光染剂 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 检测支原体污染,但若有些细胞易有荧光背景,可能会干扰结果判读。3.PCR法,利用特异性引物,经PCR反应检测支原体DNA,灵敏且快
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怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢,常见的检测方法几种:1.分离培养法,将疑样本接种到支原体培养基中,观察菌落生成。缺点:培养时间长,须3~5周才能判断。2.DNA荧光染色法,利用荧光染剂 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 检测支原体污染,但若有些细胞易有荧光背景,可能会干扰结果判读。3.PCR法,利用特异性引物,经PCR反应检测支原体DNA,灵敏且。BI EZ-PCR支原体检测试剂盒:采用PCR法,简化了细胞培养中支原体污染的检测过程,可检测出细胞培养实验中常见的支原体污染。
MTT检测法,细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出细胞数量。在一定细胞数范围内,吸光值与细胞活性成正比。
酶法多肽是以蛋白酶降解蛋白质获得的多肽。以蛋白酶对卵蛋白、乳蛋白、酪蛋白、鱼蛋白、昆豆蛋白等动物蛋白jiang解获得的多肽豆有促进、增强、调节免yi的生理功能。此类酶法多肽服食进入循环系统和人体组织后,能刺激机体的免yi系统发生特异性免yi反应。多肽进入人体后,可作为抗原,不需要T细胞的辅助就能直接刺激B细胞产生抗ti。但多肽进入人体后,可诱导和促进T细胞分化、成熟;刺激B细胞产生并分泌免yi球蛋白(抗ti)参与人体免yi反应;提高自然杀伤细胞(NK)活力。
多肽的稳定性研究,引起多肽不稳定的原因:(1)脱酰胺反应 :在脱酰反应中,Asn/Gln 残基水解形成Asp/Glu。非酶催化的脱酰胺反应的进行。在Asn-Gly-结构中的酰胺基团更易水解,位于分子表面的酰胺基团也比分子内部的酰胺基团易水解。(2)氧化:多肽溶液易氧化的主要原因有两种,一是溶液中有过氧化物的污染,二是多肽的自发氧化。在所有的氨基酸残基中,Met、Cys和His、Trp、Tyr等易氧化。氧分压、温度和缓冲溶液对氧化也都有影响。
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