内容摘要:
亲和柱亲和层析原理介绍组氨酸是具有杂环的氨基酸,每个组氨基酸含有一个咪唑基团,这个化学结构带有很多额外电子,对于带正电的化学物质有静电引力,亲和层析是利用这个原理来进行吸附的,亲和配体(也就是填料)上的阳离子(一般是镍离子)带正电对组氨酸有亲和作用。组氨酸标签是原核表达载体上6个组氨酸的区段,这个标签在ph8.0时不带电,对蛋白质的分泌,折叠,功能基本上无影响.能高度亲和镍离子,用于蛋白质的亲和纯化. 亲和柱适用注意事项(1) 呕吐毒素对人体有害,应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次酸钠浸泡过夜。(2) 不要使用过有效期的亲和柱。(3) 亲和柱应在2~8℃保存。不要冷冻。(4) 使用前,亲和柱需至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。(5) HPLC液相测定值、试剂盒计算值接近zui高检出值时,样本的实际含量可能大于柱容量而造成流穿,建议减少上样体积重新过柱。(6) 称......
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