内容摘要:
软gu细胞培养(1)豚鼠脱颈处死,备皮,用75%酒精消毒背部及四肢皮肤。(2)无菌操作下取下双侧股骨头及膝关节(保留周围肌肉,细胞实验外包选哪家,软gu不能暴露),75%酒精浸泡5分钟,转移至PBS缓冲液中,带入超净工作台,剔除关节周围附着的软组织,打开髋、膝关节,用尖刀削取关节软gu组织,置入装有PBS缓冲液的无菌培养皿,防止软gu组织被风干。(3)PBS缓冲液充分漂洗软gu小块3次,然后用小剪刀将软gu块切碎至约Imm3大小。(4)再次用PBS缓冲液冲洗3次,滤干,将细小的软gu块置入放有0.2%的II型胶原酶3ml的广口瓶里,摇匀后置于37°C恒温震荡箱中消化,40分钟后将上层消化液转移至15ml规格离心管中,800r/min离心5min,收集细胞(沉淀物),加入含10%的胎牛xue清DMEM培养液4ml并吹打混匀,制成软gu细胞混悬液。(5)把消化所得的软gu细胞混悬液收集......
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