软gu细胞培养
(1)豚鼠脱颈处死，备皮，用75%酒精消毒背部及四肢皮肤。
(2)无菌操作下取下双侧股骨头及膝关节(保留周围肌肉，细胞实验外包选哪家，软gu不能暴露)，75%酒精浸泡5分钟，转移至PBS缓冲液中，带入超净工作台，剔除关节周围附着的软组织，打开髋、膝关节，用尖刀削取关节软gu组织，置入装有PBS缓冲液的无菌培养皿，防止软gu组织被风干。
(3)PBS缓冲液充分漂洗软gu小块3次，然后用小剪刀将软gu块切碎至约Imm3大小。
(4)再次用PBS缓冲液冲洗3次，滤干，将细小的软gu块置入放有0.2%的II型胶原酶3ml的广口瓶里，摇匀后置于37°C恒温震荡箱中消化，40分钟后将上层消化液转移至15ml规格离心管中，800r/min离心5min，收集细胞(沉淀物)，加入含10%的胎牛xue清DMEM培养液4ml并吹打混匀，制成软gu细胞混悬液。
(5)把消化所得的软gu细胞混悬液收集于离心管中，经滤网过滤后用细胞计数板计数，并把细胞混悬液密度调整为2x105/ml接种于25cm2规格的培养瓶中。将培养瓶放置于CO2培养箱内。培养条件为37°C、5%CO2。
(6)未消化完的软gu小块继续用II型胶原酶如_上法消化，细胞实验外包哪家好，直至软gu块基本消失。
(7)每日在倒置显微镜下观察软gu细胞生长情况并拍照保存。
细胞实验介绍——细胞运动能力检测：
细胞划痕实验是体外模拟细胞迁移能力和修复能力快捷的检测方法。在长满的细胞培养板或者培养皿中，沿着中线使用移液器头或者其他硬物划1-3条平行的直线，去除中线的细胞，细胞在0h、12h、24h后，观察细胞往中线迁移情况，判断细胞迁移能力。
一般流程：细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照
细胞迁移和侵袭实验是体外模拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。使用不同孔径的聚碳酸酯膜transwell小室放入培养板中，将细胞接种于小室中，利用培养液成分的差异诱导细胞运动，细胞实验外包，检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。
一般流程：transwell小室准备-细胞接种-细胞培养-transwell小室染色-显微镜拍照
结果示例：
图 A 细胞划痕实验图；B，C 细胞迁移和侵袭实验图
细胞培养中常见的污染及解决方法
真菌污染
真菌污染后，培养基一般清澈，保持原色。细丝可以在显微镜下观察到。，一些真菌类似于死细胞碎片，但其中许多清晰可见，看起来像珊瑚，比较容易区分。此外，细胞实验，它们会慢慢长出细细的黑色细丝，因为它们生长得比较慢，不像细菌那样容易被发现，一旦发现培养基被污染，它们将很难存活。
解决方法：一旦被真菌污染，果断丢弃，然后对细胞房、CO2 培养箱、器皿和培养基进行消毒。
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