用水稻原生质体进行亚细胞定位时,为什么不拍摄叶绿体的自发荧光?
经测验,使用水稻黄化苗制备原生质体,载体转化效率及基因表达强度较高,而黄化苗中叶绿体较少,因此水稻原生质体定位拍照时,除非与叶绿体共定位,否则不拍摄叶绿体的自发荧光。
为什么要提供GFP空载的对照图片?
(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。
(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。

为什么不先对基因做预测,在预测的结果上直接做共定位?
不同的预测网站有不同的计算方法,同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的,对于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推荐先做普通定位,根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。
适用于什么实验场景?
(1)基因功能研究,文章里总少不了这一项。
(2)研究蛋白相互作用,双分子荧光互补,与酵母双杂实验结果相互验证。

为什么要提供GFP空载的对照图片?
(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。
(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。
拍摄时为什么有明场通道?
(1)显示细胞状态,有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态,变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。
(2)显示荧光确实是细胞内蛋白表达的,而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。
双分子荧光互补-贝科新肽(推荐商家)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”选择武汉贝科新肽科技有限公司,公司位于:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号,多年来,贝科新肽坚持为客户提供好的服务,联系人:夏总。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。贝科新肽期待成为您的长期合作伙伴!
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