乳酸菌的分离、鉴定:无菌操作条件下，称取5g泡菜，碾碎，粪链球菌，加入装有玻璃珠的三角瓶中，再加入50mL灭菌生理盐水，充分震荡后用生理盐水做10倍的梯度稀释，取10-4和10-5稀释度做平板涂布，置于37℃生化培养箱培养24h。选取表面光滑凸起，粪链球菌厂，周边整齐，直径1.0～1.5mm的菌落，做革兰氏染色，再对革兰氏阳性杆状无芽孢菌落，粪链球菌，多次划线培养直至得到纯菌株。依据《常见细菌系统鉴定手册》对菌株进行生理生化实验。 DPO(dual priming oligonucleotide)引物是由CHUN等[9]于2007年次提出，其特点在于它包含2个各自独立的特异性引物区域，5′端序列由18～25个碱基组成并与靶基因序列配对，3′端序列由6～12个碱基组成用来引导PCR反应的特异性延伸，这两段独立的特异性区域利用寡聚次(Inosine，I)进行连接，由于比一般碱基的退火温度低，在退火时寡聚次形成类似泡状的结构，从而使5′和3′区域形两个独立功能的双特异性引物结构，而且由于其特殊的结构，引物自身以及引物之间很难形成二级结构且对退火温度不敏感，在一定范围内改变退火温度对检测特异性不产生影响，如图1所示。而且理论上5′和3′任何一个区域超过3个碱基不匹配就不能扩增，粪链球菌厂家，运用DPO引物这一特点，已建立了基于DPO引物的SNP的检测方法[9]。目前，DPO引物已经被广泛应用于医学病原菌、食源性微生物等[10-11]。本研究拟运用DPO引物高特异性、不受退火温度影响等特征，结合SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR技术，建立一种特异性强、灵敏度高的植物乳杆菌检测方法。 粪链球菌、绿科生物(在线咨询)、粪链球菌由江苏绿科生物技术有限公司提供。江苏绿科生物技术有限公司（www.lvkee.com）的服务和产品，不断地受到新老用户及人士的肯定和信任。我们公司是全网商盟认证会员，点击页面的商盟客服图标，可以直接与我们客服人员对话，愿我们今后的合作愉快！ 产品：绿科生物供货总量：不限产品价格：议定包装规格：不限物流说明：货运及物流交货说明：按订单
