DPO(dual priming oligonucleotide)引物是由CHUN等[9]于2007年次提出,其特点在于它包含2个各自独立的特异性引物区域,5′端序列由18~25个碱基组成并与靶基因序列配对,3′端序列由6~12个碱基组成用来引导PCR反应的特异性延伸,这两段独立的特异性区域利用寡聚次(Inosine,I)进行连接,由于比一般碱基的退火温度低,在退火时寡聚次形成类似泡状的结构,从而使5′和3′区域形两个独立功能的双特异性引物结构,而且由于其特殊的结构,引物自身以及引物之间很难形成二级结构且对退火温度不敏感,在一定范围内改变退火温度对检测特异性不产生影响,如图1所示。而且理论上5′和3′任何一个区域超过3个碱基不匹配就不能扩增,枯草杆菌价格,运用DPO引物这一特点,已建立了基于DPO引物的SNP的检测方法[9]。目前,DPO引物已经被广泛应用于医学病原菌、食源性微生物等[10-11]。本研究拟运用DPO引物高特异性、不受退火温度影响等特征,结合SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR技术,建立一种特异性强、灵敏度高的植物乳杆菌检测方法。
乳酸菌的分离、鉴定:无菌操作条件下,称取5g泡菜,碾碎,加入装有玻璃珠的三角瓶中,再加入50mL灭菌生理盐水,充分震荡后用生理盐水做10倍的梯度稀释,江苏枯草杆菌批发,取10-4和10-5稀释度做平板涂布,置于37℃生化培养箱培养24h。选取表面光滑凸起,周边整齐,直径1.0~1.5mm的菌落,做革兰氏染色,枯草杆菌,再对革兰氏阳性杆状无芽孢菌落,多次划线培养直至得到纯菌株。依据《常见细菌系统鉴定手册》对菌株进行生理生化实验。属化能异养菌,生长需要营养丰富的培养基,需要泛酸钙和烟酸,但不需要硫胺素、吡哆醛或吡哆胺、叶酸、维生素B12。能发酵戊糖或葡萄糖酸盐,终产物中85%以上是乳酸。通常不还原,不液化明胶,接触酶和氧化酶皆阴性。能产生DL一乳酸,有1,6~二磷酸果糖醛缩酶和单磷酸己糖途径的活性,能在葡萄酸盐中生长,并产C02。发酵1分子的核糖或其他的戊糖生成1分子的乳酸和1分子。15℃能生长,通常适生长温度为30~35℃。 枯草杆菌_绿科生物科技枯草杆菌_江苏枯草杆菌批发由江苏绿科生物技术有限公司提供。枯草杆菌_绿科生物科技枯草杆菌_江苏枯草杆菌批发是江苏绿科生物技术有限公司(www.lvkee.com)今年全新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取新的信息,联系人:路庆鹏。 产品:绿科生物供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单